化妆品是一种日用化学工业产品。化妆品[1]中的常见成分有保湿剂，防腐剂，美白剂，防晒剂，抗过敏药物，抗炎药物，抗病毒药物，抗衰老药物等等。另外还有一些非法添加物，禁止添加物，有毒物质等。
高效液相色谱，是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对样品的检测[2]。
1 高效液相色谱在化妆品中的应用
1.1 防腐剂
2024 年6月肖紫芬等对79批抽样地点为福建省内宾馆、美容美发场所、洗浴场所的洗浴类化妆品中防腐剂使用种类、频次进行统计分析，显示有35批样品使用3种以上复配防腐剂，其中异噻唑啉酮类防腐剂占79.7%[3]，使用频次最高为异噻唑啉酮类防腐剂（占48.1%）。采用高效液相色谱法测定上述79批的含量，同时比对标签标识与实际检出防腐剂的一致性。结果表明，79批样品中有20批检出单一成分甲基异噻唑啉酮（MI),26批检出卡松，2批样品中卡松含量超出《化妆品安全技术规范》（2015年版）规定限值，不合格率2.5%；另有3批样品中异噻唑啉酮类防腐剂含量已达到限值，风险较高；约1/5检出卡松的样品存在配比范围超出标准规定的情况：实际检测结果与标签标识比对不一致率高达26.6%。整体使用情况不容乐观，监管需要进一步发力[4]。
1.2 防晒剂
2024年4月王磊等[5]建立了固相萃取技术结合高效液相色谱测定化妆品中几种苯并三唑类防晒剂的一标多测定量分析方法。该方法待测样品使用HLB固相萃取小柱净化处理，以亚甲基双苯并三唑基四甲基丁基酚为内参物，通过建立该物质与另外4种物质的相对校正因子，计算出各物质的含量。研究了不同进样量、不同流动相流速及不同柱温对相对校正因子的影响，比较了一标多测法和外标法的计算结果。结果表明，5种物质的线性关系良好（R2≥0.999 7），检测限和定量限分别为4.00～26.43µg/L，和10.00～60.42µg/L；各物质的相对校正因子重复性较好，其相对标准偏差（RSD）为0.25%～1.16%;2种方法计算结果无明显差异。其相对平均偏差（RAr）为0.12%～2.19%。该方法操作简单，使用标准物质少，检测效率高，可用于化妆品中5种防晒剂的含量测定和质量控制。
1.3 美白剂
2024 年4月，陶薇等[6]建立高效液相色谱法（HPLC）同时测定化妆品中24种美白成分。使用甲醇-磷酸二氢钾溶液为流动相进行梯度洗脱，色谱柱为SHISEIDO MGⅡC18柱（5µm,4.6 mm×250 mm），柱温35℃，流速为1.0 mL/min，烟酸等18种物质的检测波长为230 nm，其他6种物质的检测波长为250 nm。方法学研究结果表明，24种美白功效成分线性相关系数均大于0.999，方法检出限为8.1～438.4µg/g，定量限为60.4～1461.4µg/g，平均回收率为87.34%～103.78%，相对标准偏差（RSD）值为0.16%～4.35%。该方法简便、准确，可用于化妆品中美白类功效成分的含量测定。
1.4 糖皮质激素
2023 年12月赵倩如等[7]建立了超高效液相色谱-串联质谱法同时测定化妆品中83种糖皮质激素的分析方法。以化妆品中常用的水、乳液、膏霜（o/w型）3种基质为研究对象，对样品前处理和色谱-质谱条件进行优化，最终确定样品经乙腈涡旋分散、超声提取、过滤后，采用Thermo Accucore PFP色谱柱（100 mm×2.1 mm,2.6µm）分离，结果表明，83种糖皮质激素在2～200µg/L范围内线性关系良好，采用该方法对市售的41批化妆品进行83种糖皮质激素筛查，共发现4批阳性样品，分别检出氟轻松、倍氯米松双丙酸酯、醋酸地索奈德及地索奈德，含量范围为0.53～634.27µg/g，其中醋酸地索奈德尚未列入法定检测标准的筛查范畴。
1.5 抗感染药物
2023年12月晏润文等[8]建立超高效液相色谱-串联质谱法快速筛查化妆品中40种抗感染药物的方法。样品采用含体积分数0.5%甲酸的乙腈溶液超声提取，经Acquity UPLC BEH C18色谱柱（100 mm×2.1 mm×1.7µm）分离，以5 mmol/L乙酸铵缓冲溶液（pH=4.0）和体积分数0.1%甲酸-乙腈为流动相进行梯度洗脱，这40种抗感染药物在25～1 000 ng/mL范围内线性关系良好，检出限为0.01～1.75 ng/mL。该方法操作简便，可用于化妆品中抗感染类药物的快速筛查。
1.6 着色剂
2024年8月，严敏等[9]建立了高效液相色谱法同时测定化妆品中7种着色剂。采用四氢呋喃、二甲基亚砜和甲醇按照体积比为2∶1∶7的混合溶液对样品进行超声萃取、离心过滤膜后，在ZORBAX SB-Aq (250 mm×4.6 mm,5µm）色谱柱上分离，3个添加水平的回收率为80.98%～118.72%，测定结果的相对标准偏差为0.52%～6.83%(n=6）。该方法适用于面霜乳液、粉底、眼影、口红、指甲油等化妆品中着色剂的定量检测。
1.7 兴奋剂
2024 年3月，徐炜等[10]利用超高效液相色谱-串联质谱仪（UPLC-MS/MS），建立了一种同时测定化妆品中蛋白同化制剂、β2激动剂、糖皮质激素、刺激剂、大麻酚类等36种兴奋剂的检测方法。化妆品样品经甲醇超声提取后，以0.1%乙酸水溶液和甲醇乙腈混合溶液（体积比1∶9）作为流动相，使用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱。结果表明，36种兴奋剂组分的线性关系良好（r>0.995），检出限为1.0～3.0µg/kg，定量限为3.3～9.9µg/kg。该方法前处理操作简便，快速，灵敏度高，结果准确，适用于常见化妆品中多类兴奋剂组分的快速检测。
1.8 抗过敏药物
2023 年7月，郑佳新等[11]建立了超高效液相色谱-串联质谱法同时测定化妆品中29种抗过敏药物的检测方法。样品采用乙腈超声提取，经色谱柱分离，以0.1%氨水溶液和0.1%氨水甲醇溶液梯度洗脱，结果表明，29种抗过敏药物在线性范围内线性关系良好，相关系数均大于0.997；检出限为0.4～12.9 ng/g，平均回收率为80.9%～115.9%,RSD为0.3%～14.8%。应用该方法对10批样品进行筛查，共有2批检出阳性，其中1批检出了赛庚啶和赛庚啶杂质1,1批检出了西咪替丁。该方法操作简便，具有良好的选择性、灵敏度及准确度，能够用于化妆品中抗过敏药物的测定。
1.9 植物提取物
2024 年5月张秋炎等[12]建立了超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）测定化妆品中67种植物提取物标识成分的方法。化妆品样品经甲醇（含1%甲酸）超声提取，样液在0.1%甲酸溶液-乙腈流动相体系下经色谱柱梯度洗脱分离。3个不同加标水平下，膏霜、乳液基质的平均回收率分别为85.6%～117%和82.7%～116%，相对标准偏差（RSD,n=6）分别为1.0%～2%和0.90%～12%。该法简单快速，灵敏度高，适用于化妆品中67种植物提取物标识成分的定性鉴定和含量测定。
1.10 抗炎药物
（1）非甾体抗炎药物
2024 年5月张江维等[13]建立高效液相色谱法测定化妆品中19种非甾体抗炎药含量。化妆品样品经体积比为1∶1的乙腈-乙酸铵溶液超声提取，19种非甾体的质量浓度在5～200µg/mL范围内与其对应的色谱峰面积线性关系良好，相关系数均大于0.999 5，检出限为0.2～8 mg/kg。该方法适用于化妆品中19种非甾体抗炎药物的检测。
（2）抗组胺类药物
2024 年4月张静等[14]建立了液相色谱-三重四级杆质谱法（LC-MS-MS）快速测定化妆品中地氯雷他定等51种抗组胺类药物含量的方法。结果表明，51种抗组胺类药物在2～50 ng/mL范围内线性关系良好（r>0.999），检出限和定量限分别为0.15µg/g和0.5µg/g。对液态水基、乳液、膏霜、面膜、液态油基、凝胶、粉、蜡基8种不同化妆品基质在0.5、1.0、5.0µg/g加标水平下的平均回收率为70.3%～127.8%，相对标准偏差（RSD）小于7.7%(n=6）。
（3）抗真菌药物
2024 年4月刘轩彤等[15]采用超高效液相色谱-串联质谱法建立化妆品中烯丙胺类药物的检测方法。以体积分数80%乙腈水溶液为提取溶剂经涡旋和超声提取，上清液经微孔滤膜过滤后测定。采用多反应离子监测（MRM）模式进行定性定量分析。这4种抗真菌药物的质量浓度在0.1～32 ng/mL时，均与响应值呈良好的线性关系，相关系数均大于0.995，检出限为1.737～1.815 ng/g。
（4）抗菌类药物
2023 年10月涂晓琴等[16]建立同时测定化妆品中乌洛托品及13种喹诺酮类抗菌物质含量的超高效液相色谱-串联质谱方法，并用于实际样品的检测。方法样品经饱和氯化钠作用，再加入50%乙腈超声提取，结果14种目标成分在6.22～256.80 ng·mL-1内与测定值线性关系良好，检测限均低于0.007 ng·kg-1。结论该方法简单、快速、灵敏，能够满足化妆品中乌洛托品及13种喹诺酮类抗菌物质的检测需求。
（5）磺胺类药物
2024 年8月，杨飘飘等[17]建立了高效液相色谱-串联质谱法同时测定化妆品中53种抗感染药物的检测方法。在低、中、高3种加标质量浓度下，磺胺类和喹诺酮类的平均回收率为80.84%～115.09%。筛查的100批次样品中有1批次样品检出磺胺甲噁唑。该方法具有良好灵敏度、选择性和准确性，可用于化妆品中53种抗感染药物测定。
1.11 抗病毒类药物
2024 年1月黎莉莉等[18]建立了化妆品中阿昔洛韦、更昔洛韦、喷昔洛韦、阿糖腺苷、利巴韦林和拉米夫定6种抗病毒类药物的高效液相色谱（HPLC）检测方法。阿昔洛韦等6种组分在0.2～50.0µg·mL-1质量浓度范围内的线性关系良好，相关系数R2均大于0.999，各加标水平浓度的平均回收率为86.128%～118.850%，相对偏差小于10%，日内精密度在0.090%～2.283%，日间精密度在0.050%～2.367%，方法的重复性与稳定性良好。该方法灵敏、准确、快速，阿昔洛韦等6种组分的检验参数均能满足方法需要，适合日后方法的推广与应用。
1.12 其他禁用药物
（1）亚硝胺类致癌物
2023 年11月，汪毅等[19]采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）建立了化妆品中15种痕量N-亚硝胺化合物的分析方法。水剂样品以水或乙腈分组超声提取，膏霜乳液样品采用亚铁氰化钾-乙酸锌溶液沉淀大分子或者饱和氯化钠-乙腈盐析分组处理后，以Agilent Poroshell 120 SB-Aq (100 mm×3.0 mm,2.7µm）色谱柱分离，该方法用于市售化妆品检测，发现13批次样品检出N-亚硝基二乙醇胺（NDELA），其中1批次超限量值。适用于化妆品中15种N-亚硝胺化合物的痕量测定。
（2）非法添加物
2024年2月，张秋炎等[20]建立了同时测定5种不同基质类型化妆品中8种替丁类药物的超高效液相色谱-三重四极杆质谱法（UHPLC-MS/MS）。不同基质类型化妆品样品经水-乙腈（2∶8，体积比）涡旋混匀、超声提取后过滤上机分析。选用YMCTriart C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,3.0µm），在3个不同加标水平下，水剂类、膏霜类、乳液类、凝胶类和粉剂类样品的平均回收率分别为80.7%～106%、90.1%～102%、82.6%～101%、82.0%～110%和86.6%～101%；相对标准偏差为0.70%～7.9%。该法适用于上述5种类型化妆品中8种替丁类药物的同时快速定性定量分析。
（3）斯汀类禁用药物
2023 年4月，吴鸳鸯等[21]用高效液相色谱-质谱联用法测定3种不同基质类型化妆品中10种斯汀类禁用药物的分析方法。结果表明，3个不同质量浓度添加水平下，水剂、乳液类和膏霜类样品回收率分别为88.0%～107.8%,87.1%～106.5%和87.1%～107.7%，相对标准偏差（RSD）。
2 结语
高效液相色谱的仪器和检测方法目前来看还不能满足化妆品的检测要求，导致化妆品中的有害物质或多或少地影响到使用者的身体健康，因此需要科研人员提高高效液相色谱的仪器检测灵敏度要求，还需要继续向更高的精确度和准确度方向发展，而化妆品则需要继续向着高效、无毒、无残留方向发展，为人类的身体健康做出自己的贡献。而这将是化妆品科研人员的目标和责任。高效液相色谱的研发人员则需要继续向着为了制造出更好的化妆品，为了更好的检测化妆品的纯度，而生产出更高级和更高效的检测仪器的方向继续努力。
